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油茶活性单体对人前列腺增生上皮细胞和前列腺

油茶活性单体对人前列腺增生上皮细胞和前列腺癌细胞的抑制作用
周义源
[概述]良性前列腺增生(BPH)的组织学定义是指上皮和间充质过渡区和前列腺前尿道中细胞的过度生长和增殖。BPH的分子机制仍然未知且难以治疗。
以前的研究表明Oiltea Camellia Extract(OCE)具有改善前列腺疾病的能力。该文献使用具有高度5α-还原酶抑制活性的OCE的聚酰胺,以阐明OCE抑制前列腺增生的主要活性成分并研究其作用机制。通过定量荧光实时PCR研究了活性单体在人前列腺肥大细胞系(BPH-1)和人前列腺癌细胞系(PC-3)中的生长抑制作用。通过细胞刮擦试验测试BPH-1细胞的机制,以确定PC-3细胞的迁移能力。
主要结果如下。(1)使用固相萃取(SPE)和制备型HPLC(制备型HPLC),质谱和核磁共振用于从Frubara oleifera Fr8的橡胶组分中分离和制备单体。从结构上鉴定了具有高抑制BPH-1细胞增殖活性的单体。
三种单体3的结果 - O形没食子酰基-4,6 -[(S) - 六羟基联苯二酰基]-α/β-D-吡喃葡萄糖(geminD),3,4,6-三 -它显示为O-没食子酰-α。β-D-吡喃葡萄糖(GAG),油酸二内酯(VAD),选择结合性能选择gemin D,GAG和VAD,进一步研究其改善BPH的作用机制。
(2)用膜联蛋白V / PI双重染色法测定反应性单体对BPH-1细胞凋亡的诱导作用。
诱导1个细胞凋亡 - 结果,GeminD,GAG和VAD BPH在48小时为50μg/ mL的200μg的/ mL的浓度 - 可以在相同的浓度BPH诱导1个细胞,每种单体的凋亡?这是。活动的强度是VADgeminDGAG。
(3)通过定量实时荧光PCR检测BPH-1细胞中BPH相关基因的变化。
其结果是,geminD中,GAG和VAD BPH - 通过调整显著MYC的表达抑制细胞增殖,炎症下调功能通路环加氧酶/脂肪氧合酶(COX / LOX) - 在小区1个原癌基因c我表明我可以做到。编码COX-2蛋白的PTGS2基因和编码5-LOX蛋白的ALOX5显示活性单体在BPH-1(p0)细胞中具有良好的抗炎作用。
05)。
(4)使用PC-3细胞模型体外检测活化单体对PC-3细胞的作用。结果表明,油茶活性单体抑制PC-3细胞的生长,诱导细胞凋亡。
当作用时间为48小时时,抑制PC-3细胞增殖的geminD,GAG和VAD的IC50分别为117。
71μmol/ l,140。
69μmol/ L和132。
44μmol/ L.样品浓度为50μg/ mL至200μg/ mL。在相同浓度下,各单体诱导的PC-3细胞的凋亡活性为VADgemin DGAG。当浓度为200μg/ mL时,VAD诱导PC3。细胞凋亡率为35。
8%
细胞划痕实验表明,geminD,GAG和VAD可以抑制PC-3细胞的侧向迁移。
从Camellia sinensis中分离的三种单体geminD,GAG和VAD抑制人前列腺增生上皮细胞系(BPH-1)和人前列腺癌细胞系(PC-3)的生长它有炎症作用。用于预防和治疗前列腺疾病的产品的研究和开发的重要参考值。
[标题单位]:浙江大学[年]:硕士学位[授予年份]:2017年[分类号]:R285
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